يقيس فحص 25-Hydroxyvitamin D (25-OH-D) تركيز الشكل الرئيسي المخزن والمتنقل لفيتامين D في الدم. وهو المؤشر الأكثر دقة وموثوقية لتقييم الحالة العامة للجسم من فيتامين D، حيث يعكس الإنتاج الذاتي من الجلد (تحت تأثير أشعة الشمس UVB) والمدخول الغذائي. هذا الشكل يتحول في الكلى إلى الشكل النشط (1,25-Dihydroxyvitamin D) الذي ينظم امتصاص الكالسيوم والفوسفات ويؤثر على العديد من الوظائف الحيوية.