يقيس اختبار نوكليوتيداز-5 (5'-NT) مستوى إنزيم مرتبط بشكل أساسي بالأغشية الموجودة في الخلايا الكبدية والقنوات الصفراوية. يُعد ارتفاعه مؤشراً نوعياً لأمراض الكبد الصفراوية (الركود الصفراوي)، مما يساعد في التمييز بين أسباب ارتفاع إنزيمات الكبد الأخرى مثل الفوسفاتاز القلوي (ALP).